Zusammenfassung
Eine effiziente und qualitative Isolierung von Nucleinsäuren aus geringsten Mengen biologischen Materials wie z. B. einzelnen Bakterienkolonien oder geringen Volumina Vollbluts ist für den Einsatz in der PCR essentiell. Die isolierte Nucleinsäure muss frei von Kontaminationen sein, welche die PCR inhibieren könnte. Weiterhin ist es für die Aufbereitung vieler Proben erforderlich, dass diese Methode eine schnelle, sichere und reproduzierbare Durchführung erlaubt. Ein zusätzlicher Vorteil ist es, wenn die Isolierung der Nucleinsäuren aus vielen unterschiedlichen Zelltypen funktioniert.
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Notes
- 1.
Diese Temperatur ist sehr stark von dem Tm-Wert der eingesetzten Oligonucleotide abhängig! Die einzelnen Tm-Werte der verschiedenen Oligonucleotidpaare sollten bei der gewählten Annealing-Temperatur gleich gut binden.
Literatur
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Müller, HJ., Prange, D.R. (2016). Colony PCR. In: PCR - Polymerase-Kettenreaktion. Springer Spektrum, Berlin, Heidelberg. https://doi.org/10.1007/978-3-662-48236-0_15
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